У трећој фази, дијагностикују се алергије кожне тестове.

Постоје такве врсте кожних тестова (Р. Иа. Месхкова и др.):

Индикације за постављање кожних тестова су подаци алергијске анамнезе који указују на улогу алергена или групе алергена у патогенези болести.

Контраиндикације за постављање кожних тестова су:

  • Акутна фаза алергије;
  • Погоршање хроничних болести;
  • Акутне заразне болести;
  • Туберцулосис;
  • Онколошке, аутоимуне, системске болести;
  • Болести крви;
  • Декомпензирани услови код болести срца, бубрега, јетре;
  • Болести крви;
  • Конвулзије;
  • Нервне болести;
  • Болести психе;
  • Лечење антихистаминима, хормонима, бронхоспасмолитичким лијековима;
  • Старост до 3 године;
  • Трудноћа, дојење, прва три дана менструалног циклуса;
  • Анафилактички шок, као и Стевенс-Јохнсонов синдром, Лиелл у анамнези.

Избор врсте теста коже зависи од етиологије болести, као и степена сензибилизације пацијента.

Имунолошки тестови коже

Аделман Д., ред. - Имунологија

2. Имунодифузија је најчешћа од свих метода заснованих на реакцији преципитације (види поглавље 20, стр. ИБ-Б).

а. Једноставна радијална имунодифузија. Суштина методе је следећа: 1) у танком слоју гела који садржи антитела у познатој концентрацији, отворе се рупе; 2) антиген који се налази у овим бунарима дифузује у гел; 3) прстенови падавина се формирају око бунара, чији пречник је пропорционалан концентрацији антигена. Метода се обично користи за одређивање концентрације имуноглобулина.

б. Двострука радијална имунодифузија. Суштина методе је следећа: 1) у танком слоју гела, руке се исечу за антиген и антитела; 2) антиген и антитела дифузују једни према другима, формирајући линију падавина на одређеној удаљености од извора. На растојању од бунара који садржи антиген до линије падавина може се одредити концентрација антигена.

3. Електрофореза а. Имуноелектрофореза је комбинација две методе, имунодифузије и зоналне електрофорезе. Имуноелектрофореза се углавном користи за проучавање протеина сурутке. Суштина методе је следећа: 1) серум који се тестира ставља се у добро резани слој танког гела; 2) електрофоретска сепарација серумских протеина; 3) у гелу сечемо жљеб, паралелно са правцем миграције протеина током електрофорезе и попуњавамо смешом антитела са протеинима сурутке; 4) протеини одвојени електрофорезом (антигени) и антитела која се дифузују једни према другима. На местима где се антитела везују за антигене, формирају се лукови падавина (види Поглавље 20, И.А).

б. Контролна електрофореза. Суштина методе је следећа: 1) испитивани антигени и смеша антитела смештени су у бунаре постављене на супротним крајевима плоче са гелом; 2) константна електрична струја пролази дуж линије која повезује рупе; 3) у електричном пољу, антитела и антигени брзо крећу према другима; 4) на месту везивања антигена са антителима формирају се линије падавина. Контролна електрофореза се користи у случајевима где антигени и антитела имају различиту електрофоретску покретљивост. Овај метод вам омогућава да брзо одредите антигене или антитела у тест узорку и користите у брзој дијагнози заразних болести.

Д. Методе засноване на реакцији аглутинације су прилично осетљиве и користе се за идентификацију антигена на површини ћелија или честица и полуквантитативно одређивање антитела на ове антигене. Суштина метода је следећа: када се везују ћелије или честице обложене антигеном, велики агрегати се формирају са антителима. Да би се одредила титар антитела за ћелијске површинске антигене или антигене адсорбује на површини честица, помешају познате количине ћелија или честица обложен са антигеном са различитим разређења тестираног узорка, као што је серум.

1. Директна аглутинацијска реакција се користи за откривање површинских антигена микроба или крвних ћелија и антитела на ове антигене. Суштина методе је следећа: серијска разблаживање узорка за тестирање (на пример, серум) се помеша са ћелијама, јер се титар антитела узима као инверзни максимални разблажење серума, што узрокује аглутинацију. Ова метода је осетљивија од метода заснованих на преципитацији, јер са једнаком концентрацијом антигена, запремина аглутината је већа од запремине талога. Реакција аглутинације је независна од температуре, осим ако није због хладних аглутинина који су ефикаснији на температурама испод 37 ° Ц.

2. Индиректна реакција аглутинације базирана је на аглутинацији еритроцита, других ћелија или честица (нпр. Латекса или бентонита) превучених антигеном. Да би се одредио титар антитела, серијска разблаживања серума у ​​физиолошком физиолошком раствору помешана су са познатом количином ћелија или честица обложених антигеном. Индиректна реакција аглутинације је осетљива метода која омогућава одређивање растворних антигена у ниским концентрацијама.

Е. Реакција фиксације комплемента. Суштина методе је следећа: 1) антиген се помеша са антителима; 2) позната количина комплемента се додаје резултирајућим комплексима антигена-антитела, који се везују за ове комплексе; 3) количина неограниченог комплемента се процењује у реакцији хемолизе са еритроцитима пака.

Е. ЕЛИСА са солидним фазама је поуздан, економичан и високо осетљив метод. Заснован је на употреби стандардних препарата пречишћених антигена или антитела ковалентно везаних за ензим. Ови препарати задржавају и имунолошка својства и ензимску активност, која се могу мерити додавањем супстрата овог ензима (види Поглавље 20, параграф И.Е).

Г. Остале методе 1. Одређивање нивоа Ц-реактивног протеина. Ц-реактивни протеин је протеин акутне фазе инфламације у вези са бета-глобулини. Ц-реактивни протеин, као и остали протеини акутне фазе упале, појављује се у серуму непосредно након оштећења ткива и почетка упале. Побољшање Ц-реактивног протеина посматрано код акутних бактеријских и вирусних инфекција, инфаркт миокарда, малигнитета и аутоимуних болести (види. Лист 15. п.ИИ.Б).

2. Одређивање титра хладних аглутинина. Хладни аглутинини су ИгМ, који узрокују максималну аглутинацију еритроцита на 4 ° Ц. Хладни аглутинини се појављују у неким болестима, на пример, са микоплазмом пнеумонијом, а мање често са грипом, аденовирусном инфекцијом и другим акутним респираторним болестима, као и са спавањем болести. Дијагностички значајан је откривање хладних аглутинина у титру од 1:32 или четвороструко повећање титра у року од 7-14 сати.

3. Одређивање титра аглутинационих антитела. Аглутинација антитела патогена појављује у серуму у многих заразних болести: салмонелоза, паратифа, бруцелозе, туларемије, тифуса и других. Титар ових антитела може се одредити у реакцији аглутинације инактивираних бактерија када се додају различите серумске дилуције. Серум за истраживање обично се сакупља два пута: током врха и током опоравка (након 10-21 сати). Четвороструко повећање титра антитела сматра се дијагностиком.

4. Неуфелдова реакција-отицање бактеријског ћелијског зида под дејством антитела на специфичне типове капсуларних полисахарида видљивих светлосном микроскопијом. Ова реакција се може посматрати додавањем антитела усмерена против ћелијског зида полисахарида Хаемопхилус инфлуензае, Стрептоцоццус пнеумониае и Неиссериа менингитидис (серотиповА и Ц), ове бактерије. Неуфелдова реакција се користи за испитивање серума и ЦСФ.

5. Реакција с лицејем амебоцита коњичка (Лимулус полипхемус) се користи за дијагнозу инфекција, нарочито сепсе и менингитиса изазваног грам-негативним бактеријама. Метода се заснива на чињеници да ће се приликом додавања бактеријских ендотоксина течни лизат амоебоцита мача претворити у гел.

ИВ. Испитивања коже

Тестови на кожи засновани на алергијским реакцијама одложеног типа су најједноставнији и најспособнији начин процене целуларног имунитета.

А. Антигени за испитивање коже. Скин тестови се обично врши са пречишћеном туберкулин, трихофитоном, дерматофитином0, тетанус токсоид, заушке антигена вируса, а Цоццидиоидес иммитис (види. Поглавље 18, и п.ИИИ.Зх табл.22.2).

Б. Болести и услови који су праћени инхибицијом целуларног имунитета и, стога, алергијских реакција са закашњењем су наведени у наставку.

1. Примарне и секундарне имунодефицијенције.

2. Акутне вирусне инфекције, укључујући и заушке, рубеле, ошопе, инфекцију узроковану вирусом варицелла-зостер, грипом, инфективном мононуклеозом.

3. Гљивичне инфекције, као што су кокцидиоидоза, криптококоза, аспергилоза.

4. Бактеријске инфекције, укључујући туберкулозу, бактеријски менингитис и пнеумонију.

5. Малигне неоплазме.

6. Имунизација са живим вирусним вакцинама.

7. Лечење са кортикостероидима и имуносупресивима.

8. Аутоимуне болести.

9. Велике операције.

Б. Техника за извођење кожних тестова 1. Површина коже за ињекцију се третира антисептиком.

2. Интрадермално убризгајте 0,1 мл раствора антигена. Да бисте то урадили, користите 1-мл туберкулински шприц и иглу од 12 грама са 27 грама.

3. Поставите ињекцију у неизбрисиву оловку.

4. После 24-72 сата (у зависности од коришћеног антигена) се мере две величине еритема и папула, израчунава се средња величина и приказује се тест коже у милиметрима.

Д. Реакција на интрадермалну примену антигена и вријеме његовог развоја зависе од врсте антигена (види Табелу 2.2.2).

В. Дијагноза вирусних инфекција.

Тренутно се широко користе 4 начина дијагностиковања вирусних инфекција: 1) изолација вируса у ћелијској култури (најтачнији метод); 2) откривање цитоплаземских, интрануклеарних инцлусионс и гигантских мултинуклеарних ћелија у ожиљним мрљама; 3) откривање не мањег од четири пута повећања титра антитела на вирус у различитим стадијумима болести; 4) откривање вируса или његових антигена у ткивима и биолошким течностима уз помоћ брзих тестова.

А. Материјал за изолацију вируса у култури ћелија може да служи као мрље из слузнице фарингеала и назофаринкса, спутума, урина, фекалија, крви, ЦСФ, ексудата, биопсије. Када се узимају узорци, узимају се асептична правила, узорак се ставља у стерилну посуду и транспортује у лабораторију. Ако се сумња на додатне опасне инфекције, узимају се додатне мере предострожности и користи се посебна опрема. Излучивање у овом случају врши се у специјализованим лабораторијама.

Б. Соскоб са дна вејица 1. Направите рез са скалпелом дуж периферије везикла.

2. Подигните пилинг епидермис и уклоните течност помоћу тампона.

3. Скалпел направи стругање са дна вејица. У исто време, крварење треба избегавати.

4. Добијени материјал се преноси на 2 чиста стакла и 2 тачке се израђују пречником од 5-10 мм.

5. Млаз се суши на ваздуху и поправља алкохолом.

6. Фиксне мрље обојене за Гиемсу или третиране антителима означеним флуоресцентном бојом.

7. Да би се постигли поуздани резултати, стругање се врши три пута.

Б. Производња антитела на вирусне антигене може се проценити помоћу реакције неутрализације, реакције инхибиције хемаглутинације, реакције везивања комплемента и чврсте фазе ЕЛИСА. Узорци крви (2-10 мл) се узимају у раној фази болести и након 2-3 недеље. У стерилним условима добија се серум, стављен у стерилну цев и складиштен у фрижидеру или замрзнут (-20 ° Ц) пре испоруке у лабораторију. Дијагностички значајан је четвороструко повећање титра антитела у току болести.

1. Реакција фиксације комплемента (види поглавље 22, тачка ИИИ.Д).

2. Реакција неутрализације је високо специфична метода заснована на везивању антитела и неутрализацији вируса. Метода дозвољава одређивање нивоа антивирусних антитела и способност серума да се тестира да неутралише вирусе. Суштина методе је следећа: 1) извршена серијска разређивања серума теста; 2) различита разређивања серума се мешају са познатом количином вируса; 3) серум се додаје у културу ћелија осјетљивих на вирус; 4) неутрализирајућа активност серума се процењује смањењем способности вируса да заразе ћелијску културу.

3. Реакција инхибиције хемаглутинације је изузетно специфична и осетљива метода, што омогућава одређивање чак и малог броја антивирусних антитела у биолошким течностима. Овај метод се заснива на способности неких вируса да сорбирају на еритроците, нарочито на људским еритроцитима групе 0 и еритроцитима пилића, и узрокују хемаглутинацију. Ако проучавана биолошка течност садржи антивирусна антитела, када се дода вирусима, примећује се инхибиција хемаглутинације. Што је већи садржај антивирусних антитела у тестној течности, већа хемаглутинација је потиснута.

Д. Серолошке методе засноване на употреби стандардних антивирусних антитела користе се за брзу дијагнозу вирусних инфекција. Ове методе су наведене у наставку.

2. Анализа имунофлуоресценције.

3. Солид-фаза ЕЛИСА.

Е. Инфективна мононуклеоза изазива Епстеин-Барр вирус. Болест обично долази у детињству и младости. Карактеристични манифестације инфективног мононуцлеосис су грозница, бол у грлу, оток лимфних чворова, спленомегалија, лимпхоцитосис. Пошто слична клиничка слика се такође посматрани током ЦМВ инфекције, бруцелоза, туларемије, акутне токсоплазмозе и рубеоле у ​​раним фазама, серолошке методе које се користе за дијагнозу инфективног мононуклеозе.

1. Хетерофилна антитела-ИгМ, у интеракцији са антигеном животиња неповезаних врста, на пример, овна или бик. Ова антитела се детектују код приближно 90% пацијената са инфективном мононуклеозом. Хетерофилна антитела у малом титру могу бити присутна код здравих људи.

а. Тест Паул-Буннелл је стандардни метод лабораторијске дијагнозе инфективне мононуклеозе. Састоји се од детекције хетерофилних антитела на еритроците оваца помоћу реакције хемаглутинације. Хетеропхилиц антитела у Инфективна мононуклеоза хетеропхиле разликују од антитела присутних у серуму здравих и болесних серумска болест, способношћу да се апсорбује заморче црвених крвних зрнаца и говеђег ткива бубрега (види Табл.22.3.). Титар од 1: 128-1: 256 се сматра смисленим. Хетерофилна антитела обично се откривају након 3-4 недеље након појаве болести. Паул-Буннелл реакција је позитиван код леукемије, вирусног хепатитиса, цитомегаловирус инфекција, Буркитов лимфом, реуматоидни артритис и после давања имуног серума. Титар антитела не одражава тежину болести, али када се мери у динамици, дозвољава вам да пратите ток болести.

б. Експрес тест за хетерофилна антитела (Моно-Тест, Вемполе Лаборетрис). Хетерофилна антитела у овој студији откривена је аглутинацијом стабилизованих еритроцита коња. Апсорпцију ткивом бубрега гвинеје свиње и црвених крвних зрнаца не врши се бик.

2. Специјалне серолошке методе. Инфективна мононуклеоза није увек праћена појавом хетерофилних антитела. Они су посебно одсутни код деце. У овом случају користе се следеће серолошке методе.

а. Антитела на капсидни антиген Епстеин-Барр вируса откривена је имунофлуоресценцијом. У раној фази болести, ИгМ до капсидног антигена се појављује у серуму пацијента. Њихов титар постаје максималан после 2 седмице након појаве болести и опада у року од 2-3 месеца. Присуство ИгМ у капсидном антигену Епстеин-Барр вируса указује на недавну инфекцију и ИгГ-о претходној болести.

б. Антибодије раним антигеном Епстеин-Барр вируса откривају се индиректном имунофлуоресценцијом. Титар ових антитела постаје максималан након 2-3 недеље након појаве болести.

ц. Антибодије нуклеарном антигену Епстеин-Барр вируса откривене су индиректном имунофлуоресценцијом уз помоћ комплемента и означених антитела на њега. Антитела на нуклеарни антиген појављују се око 4 недеље након појаве болести и истичу током живота.

Е. Вирусни хепатитис је системска заразна болест, која се манифестује доминантним оштећењем јетре. Они су узроковани вирусима хепатитиса А, Б, Ц, Д, Е, Епстеин-Барр вирусом, цитомегаловирусом, вирусом варицелла-зостер, аденовирусима.

1. Вирус вируса хепатитиса А који садржи величину 27 нм. Највероватнији лабораторијски знак болести је откривање ИгМ-а против вируса хепатитиса од стране РИА или ЕЛИСА чврстог стања. Модификацију методе хемаглутинације засноване на аглутинацији еритроцита уз додавање вируса и серума (извор комплемента и противвиралних антитела) се користи мање често. Дијагностички значајан је четвороструко повећање титра антивирусних антитела у року од 4 недеље. Детекција вируса у фецесу врши се електронском микроскопијом узорака третираних антивирусним антителима.

2. гепатитаБ вирус садржи дволанчану ДНК окружен величином нуклеокапсидног од 27нм, који укључује ХБцАг, и спољашњи омотач садржи ХБсАг. ХБсАг налазе у крви из 6нед пре појаве симптома и може се открити дуго времена ако постоји, ау њиховом одсуству (а код хроничних носилаца хепатитиса). У раним стадијумима болести, овај антиген се налази код 90-95% пацијената. Антитела се појављују са ХБсАг у серуму 2-26нед након нестанка ХБсАг, детекција ових антитела указује опоравак и развој имунитета. Антитела на ХБцАг се појављују у крви у акутној фази болести. Чак и поједина детекција ових антитела у серуму вероватно указује на акутни хепатитис изазван вирусом хепатитиса Б. Код појединаца у серуму, након опоравка, ХБсАг постоји дуго времена, често се детектују антитела на ХБцАг. Трећи антиген гепатитаБ- ХБеАг- обично појављује након ХБсАг на крају инкубационог периода, или у раној фази болести. Појава серумског ХБеАг означава акутни и идентификацију антигена дуже тајм- хроничног хепатитиса изазване вирусима гепатитаБ. Након нестанка ХБеАг у серуму појављују се антитела на њега. Присуство ових антитела у серуму указује на опоравак и дуготрајно откривање ХБсАг-носиоца вируса хепатитиса Б. Ризик од инфекције серума пацијента открије истовремено ХБсАг и ХБеАг, 10 пута већа него из серума пацијента која истовремено идентификује антитела ХБсАг и ХБеАг, а ХБеАг је одсутан. Детекција у серуму пацијента ХБсАг и ХБеАг указује на висок ризик од инфекције у контакту са овим пацијентом. Свеобухватна дефинитион гепатитаБ вирусни антигени и антитела на њих се постави дијагноза, одредити стадијум болести, за процену ризика од инфекције и имуног одговора.

3. Вирус хепатитиса Ц се односи на вирусе који садрже РНК. Инфекција са вирусом хепатитиса Ц је главни узрок пост-трансфузионог хепатитиса н-А н-Б (70-90%). Од 1990. године. постало је могуће одредити антитела на вирус хепатитиса Ц. Обично се могу открити не пре три месеца од појаве болести, када активност АСАТ-а и АЛАТ почиње да се смањује. Пошто антитела на вирус хепатитиса Ц не врше заштитну функцију, њихов изглед не одражава развој имунитета. Још једном треба нагласити да одсуство антитела на вирус хепатитиса Ц не искључује болест.

4. Вирус хепатитиса Д се састоји од дефектне РНК и ХДАг, окружене спољним омотачем који садржи ХБсАг. Вирус хепатитиса Д реплицира само у присуству вируса хепатитиса Б и налази се углавном код зависника од дроге, хомосексуалаца и хемофилијака. Овај вирус чешће него други патогени виралног хепатитиса, узрокује фулминантни хепатитис и цирозу јетре. Серодиагноза хепатитиса Д темељи се на употреби антитела за ХДАг. Хепатитис Д је искључен када се жутица поврати након хепатитиса Б.

5. Вирус хепатитиса Б. Механизам преноса је фекално-орално. У многим земљама постоји епидемија хепатитиса Е узрокована употребом контаминиране воде. Комплети за детекцију антитела на вирус хепатитиса Е могу се добити од Центара за контролу болести.

Г. ХИВ. За дијагнозу ХИВ инфекције користе се чврсти ЕЛИСА и имуноблоттинг (види поглавље 19, тачка И.1).

ВИ. Дијагноза бактеријских инфекција

А. Инфекција микоплазме. Раније се веровало да микоплазме заузимају средњу позицију између бактерија и вируса: разликују се од вируса способношћу раста у ћелијама без околиша, као и од бактерија, одсуства ћелијског зида. Тренутно се обично називају бактеријама. Најчешћи патоген микоплазме инфекције је Мицопласма пнеумониае- цаусинг пнеумониа код деце и младих људи. Мицопласма хоминис и Уреапласма уреалитицум узрокују инфекције уринарног тракта и гениталног тракта. Микоплазма се може открити у усевима, потребно је 2-4 недеље да расте. Испод су серолошке методе дијагнозе микоплазмалне инфекције.

Предавање 7. Главни облици имунолошког одговора. Серолошке студије. Имунски статус. Кожни и алергијски тестови

Хепатоцелуларни карцином је малигни тумор који се развија из хепатоцита. Цхолангиоцелуларни карцином је малигни тумор који се развија из епитела жучних канала.

Тумори јетре.

Међу бенигни најчешће се јављају тумори јетре кавернозни хемангиом.

Макроскопски - то су цијанотично-црвени мекани чворови, обично не преко 2 цм у пречнику, али може бити више. На резу, чворови имају спужвасту структуру.

Хистолошки овај тумор се формира васкуларним шупљинама различитих величина. Кавитете су обложене ендотелијом и испуњене крвљу или крвним угрушцима. Зидови шупљина формирају септа везивног ткива.

Тумор има фиброзну капсулу.

Ретко у јетри могу развити бенигни тумор - хепатоцелуларни аденом (хепатома). Често се развија код младих жена које су дуго времена узимале оралне контрацептиве. Аденоми расте у облику чворова различитих величина, понекад до 30 цм, боја на резу је шарено жуто-браон с зеленкастим нијансом. Хистолошки, тумор има трабекуларну или тубуларну структуру, портални тракти су одсутни, а конзервиране жучне капиларе.

Малигни тумори јетре.

Карактеристике хепатоцелуларног карцинома: морбидитет има географске разлике; се јавља код особа које једу храну загађену афлотоксинима (производи измјењивача гљивица); постоје и особе - носиоци аустралијског антигена вируса Б и Ц; Велика већина случајева су мушкарци; често се овај рак јавља на позадини цирозе велике јетре јетре.

Макроскопски Изолат: нодуларни, масивни и дифузно-инфилтрациони облик хепатоцелуларног карцинома. Тежина јетре са растом тумора је повећана на 2-3 кг. Чворови тумора су смеђи или зелени.

Хистолошки Карцином има трабекуларну, жлездану и чврсту структуру. Туморске ћелије су велике, често мулти-нуклеарне, постоје џиновски атипични хепатоцити. Некрозе, крварење се константно налазе у туморском ткиву. Метастатски ГАЦ је хематогено.

Карактеристике холангиоцелуларног карцинома -је чешћа код пацијената старијих од 60 година. Није повезан са цирозом или вирусном инфекцијом. Често се посматрају у подручјима са хелминтхиц инфестатион-опистхорцхиасис. Макроскопски блатобран у облику чвора или чворова густе конзистенције беле боје. Хистолошки, овај аденокарцином је тубуларни или папиларни, често са слузи. Метастазира хематогене и лимфогене.

Секундарно оштећење јетре је уобичајено. Јетра метастазирају туморе гастроинтестиналног тракта, плућа, дојке, бубрега, меланома коже.

Резиме.

У ткиву јетре могуће је развити много међусобно повезаних патолошких процеса: дистрофија, некроза, упала, склероза и раст тумора. У зависности од предности једног од ових процеса или њихове комбинације у јетри, разликују се групе болести: хепатоза, хепатитис, цироза и тумори јетре. Често се хепатозе и хепатитис претварају у цирозу јетре, која постаје позадина за развој рака јетре.

Уџбеник "Патолошка анатомија", М. А. Палчев, Н. М. Аничков, вол.2, стр. 1, стр. 433-446. "Водич практичних вежби о патолошкој анатомији", МА Палтсев, НМ Аницхков 2002, стр. 624 - 652.

1.Концепт имунолошке дијагнозе, имуно индикација, серодиагноза.

2.Опште карактеристике реакција имуности, области њихове практичне примене:

1) једноставна (двокомпонентна): А) реакција аглутинације;

Б) реакција падавина;

Б) реакција неутрализације;

2) комплексни (мултикомпонентни):

А) РСК (реакција фиксације комплемента);

Б) реакције користећи означене антигене - АХ или АТ.

3. Концепт имунолошког статуса.

4. Алергија као модификовани облик имунолошког одговора:

1) концепте алергије и алергена;

2) путеви и групе алергена;

3) класификација и интензитет алергијских реакција, фазе њиховог развоја;

4) врсте алергијских реакција;

5) кожне и алергијске тестове, њихове врсте.

Д.З. на уцх. Прозоркиној пп. 118-121, 134-135 ал; 2007 130-138;

Цхеркес п. 180-197, 228-234 ал.

1. Иммунодиагносис- секција имунологије, проучавање и развијање метода препознавања инфективних и неинфективних болести.

Имуномикробиолошке студије су врста микробиолошке експресне анализе за детекцију специфичних антитела и антигена.

На основу имунолошких метода серолошке реакције, за формулацију којих се користи серум, који садрже антитела (на основу интеракције антигена и антитела) и целуларни реакције, на основу интеракције антигена (алергена) са Т ћелијама.

Позвани су реакције имунитета АГ + АТ серолошки и карактеришу следећа својства:

1) специфичност - способност АХ (АТ) да реагује само са одговарајућим АТ (АХ).

2) осетљивост - минимална количина АХ или АТ, што се открива овом реакцијом.

Свака реакција имунитета може бити представљена: АГ + АТ = РЕЗУЛТАТ

Имунолошке методе користе се за решавање многих проблема:

  1. Евалуација стања људског имунолошког система (имунолошки статус) одређивањем квантитативних и функционалних карактеристика имуних ћелија.

2. Одређивање састава и карактеристика људских ткива: крвне групе, Рх фактор, антигени трансплантације.

3. Дијагноза заразних болести и отпорност на њих открива и успостављање антитела титар (серодијагностиковање), детекција антигена патогена у телу, одређивање ћелијских одговора на ове антигене.

4. Сероидна идентификација култура бактерија и вируса изолованих из људског тела.

5. Идентификација у људском организму и околини било које супстанце које поседују антигену или хаптен особине (хормони, отрови, лекови, лекови).

6. Идентификација имунопатолошких стања, алергија, трансплантација и антитуморних реакција.

Имуно-индикација - дијагностичка метода која има за циљ откривање микробиолошког АГ у материјалу под истрагом.

кАГ + АТ = резултат (на пример, ЕЛИСА)

Стандардни дијагностички лекови су имунолошка сера (аглутинацијска) или антиинфламаторна дијагностика (еритроцит).

Серодиагностика - метода чија је сврха детекција у серуму (пљувачка, цопрофилтерс) испитане непознате АТ.

АГ + хАТ = резултат. АТ може бити различитог поријекла: постинфективна, заразна, итд.

Правила узорковања крви за имунолошки преглед.
Ова метода се користи у другој недељи болести; крв се узима од улнарне вене у количини од 5-6 мл на празном стомаку, поштујући правила асепса.

За серолошки преглед, крв смештена је у термостат 30-60 минута; добијени крвни угрушак је одвојен од зида стерилног стакленим штапићем и оставити у фрижидеру 18-20 сати растојању серум пажљиво излије у епрувету (стерилном).; У случају примјене еритроцита, центрифугира се. Серум се може складиштити у стерилним условима у фрижидеру до 1 месеца.

Фазе реакција имунитета:

1) Имунолошки - специфични (невидљиви). Комплексни АГ + АТ се формира брзо.

2) физичко-хемијска - неспецифична (видљива).

У директним седиментним реакцијама, комплекси се агрегирају и преципитирају АГ + АТ, али захтијева електролит (физиолошко рјешење).

2) неспецифичан - фаза манифестације карактерише вањски знаци формирања имунских комплекса. Ова фаза може се развијати од неколико минута до неколико сати.
Оптимална специфична интеракција антитела са антигеном се јавља у изотоничном раствору са пХ близу неутралног. Реакција антиген-антитела у ин витро систему може бити праћена појавом неколико појава - аглутинација, падавине, лиза. Симптоми реакције зависе од физичко-хемијских својстава антигена (величине честица, физичко стање) и типа класе антитела (комплетних и непотпуним) и експериментални услови (медиум конзистенција, концентрација соли, пХ, температура).

МедГлав.цом

Медицински болести

Главни мени

Дијагноза алергијских болести. Анамнеза, тестови, тестови, имунолошке студије за алергије.

ПРИНЦИПИ ДИЈАГНОСТИКЕ АЛЕРГИЈЕ.


Задаци дијагнозе алергијске болести су:

  • Одређивање природе болести (алергичне или неалергијске). Често се може утврдити на основу карактеристичних притужби пацијента и клиничке слике болести (нпр. Код поллинозе, серумске болести). Међутим, понекад постоје значајне потешкоће (нпр. Са неуобичајеним реакцијама на узимање лекова, хране, итд.);
  • Неопходно је разликовати да ли је ова алергијска болест заиста алергична или псеудоалергична, односно да је неопходно одредити степен учешћа имуних и неимунских механизама у развоју ове болести;
  • Важно је сазнати узрок ове болести. Познавање узрока, заједно са успостављањем истинске алергијске природе процеса, даје основу за додатни адекватан третман, именовање специфичне хипенсензибилизације.

Карактеристике испитивања су широка употреба специфичних дијагностичких тестова ин виво и лабораторијских тестова.


АЛЛЕРХОЛОГИЈА АНАМНЕЗЕ.


Под вођством академика Академије медицинских наука СССР АД Адо, развијена је схема историје болести, где су детаљно формулисана питања алерголошке анамнезе. Главни задаци анамнезе:

  • Да утврди да ли постоји наследна предиспозиција за алергијске болести;
  • Идентификовати однос између фактора животне средине и развоја болести;
  • Идентификовати оне групе алергена или појединачне алергене које могу изазвати алергије.

Током испитивања сазнати шта алергије су у прошлости или су тренутно у породици пацијента, као пацијент реагује на увођење серума, вакцина, лекова; да ли је означена сезона болести, његов однос према обичном прехладу; где и када постоје погоршања, који су услови смештаја и рада.

На пример, за пацијенте са алергијом на кућну прашину карактеристичан је "ефекат елиминације" - побољшање стања приликом напуштања куће.
Са алергијама на неке алергене производње, карактеристичан је "ефекат понедељка" - погоршање стања на послу након викенда. Комуникација са прехладама се обично налази код пацијената са инфективно-алергијским обликом бронхијална астма, ринитис. За пацијенте поллиноза који се карактерише изразитом сезоналошћу обољења - његово погоршање током цветања биљака, чији полен је алерген. Наследна предиспозиција се открива код пацијената са реактивним типом алергијских реакција.

Стога, већ саслушавање пацијента омогућава утврђивање могућих алергена и предлаже врсту алергијске реакције. Ове претпоставке треба потврдити посебним методама испитивања - кожом, провокативним и другим тестовима.

СКИН ТЕСТОВИ У АЛЛЕРГИЈИ.

Кроз кожу алерген се убризгава да детектује специфичну сензибилизацију тела и процени величину и природу развијеног едема или инфламаторну реакцију. Тестови коже (ЦП) су обично у периоду ремисије.

Разликовати: квалитативне и квантитативне, директне и пасивне тестове коже.

  • Квалитативни тестови одговорите на питање: да ли постоји сензибилизација за овај алерген или не? Позитивни тест се још увек не сматра доказом да је дат алерген узрок ове болести. Разлог може бити и других алергена на које ЦП НИЈЕ ставилас.Сенсибилизатсииа на алерген се увек не завршава развој алергијске реакције. Због тога, код људи, очигледно здрави, можемо открити постојање сензибилизације за одређену алерген (кућну прашину, стрептококе и др.) Без икаквих знакова алергијске реакције.
    Алерген се може сматрати узрочником болести када се позитивни резултати теста поклапају са подацима анамнезе. У одсуству такве коинциденције или недовољног изражавања, ЦП је провокативни тестови.
  • Квантитативни узорци дајте идеју о степену сензибилизације. Постављени су да идентификују индивидуалну осетљивост и решавају питање почетних доза алергена приликом спровођења специфичне хипензензитивности.
  • Када Директни КП алерген се даје пацијенту у питању. Када Пасивни или индиректни ЦП серум крви пацијента интрадермално се убризгава у здраву особу, а затим се алергени (реакција Прауснитз-Киустнер) ињектира у места ињектирања серума.

Време појављивања кожне реакције након излагања алергену и његовој природи зависи од врсте алергијске реакције. Када реактивни тип (И тип) реакција се јавља у првих 10-20 минута. То је блистер округлог или неправилног облика са псеудоподијом. Боја блистера је ружичаста или бледа са зонама артеријске хиперемије. Ова реакција названа је реакција блистера, уртикарина или непосредни тип.
У алергијским процесима имунокомплекс и одложени типови (ИИИ и ИВ типови) Реакција коже је акутна упала са свим својим симптомима - црвенило, оток, грознице у области инфламације и осетљивости. Разлика између типова ИИИ и ИВ је време развоја и интензитета упале. У типу ИИИ упала је израженија, чини се након 4-6 сати, а пролази кроз 12-24 сати. У типа ИВ упала достиже максимално 24-48 сати. Дакле, коришћење ЦП може одредити врсту алергијске реакције на алерген.

Сцарифицатион КП.
Уз овај тип мењача се примењује на кожу подлактице у облику капи различитих алергена у региону 2-2.5 цм и пада у свакој одвојено за сваку алергена ланцете или крају иглом произведе оштетити епидерма тако да не оштећују крвне судове. Варијанта оваквог типа ЦП је пробни тест (пробни тест) - пробијање игле за ињекцију само са епидермисом. Скарификатсионние КП користи када претпостављају реагиниц типа алергијске реакције (са поленске алергије, атопијски виду астме или ринитиса, ангиоедем, уртикарија). Они откривају само реактивну врсту алергије. Процењују се након 15-20 минута.

Интрадермални тестови.
У овом типу КП, алерген се администрира интрадермално. Ови узорци су осетљивији од скарификације, али мање специфични. Када се формулишу, компликације могу настати у виду органа и опћих алергијских реакција. Користе се за откривање сензибилизације на алергене бактеријског и гљивичног порекла, као и за одређивање степена осетљивости на алергене неинфективне природе. Алергени инсекта хименоптерана често не дају позитивне узорке узорка, тако да се они ињектирају интрадермално, а реакција се открива у виду системских манифестација. Тест са овим алергенима може се приписати провокативним тестовима.

Реакција Прауснитз-Киустнер - реакција пасивне сензибилизације коже.
Коришћен је за дијагнозу реактивног типа алергијских реакција, на пример за лекове, алергије на храну, итд., Као и за проучавање својстава реактана и одређивање њиховог титра. Принцип реакције је интрадермално примање серума од пацијента до здравог примаоца и накнадно уношење алергена на ова места. Ако постоје одговарајућа антитела у серуму крви примаоца на местима његове примене, развија се непосредна кожна реакција. Тренутно се ова реакција ријетко користи због опасности од преноса латентне инфекције серумом крви (вирус хепатитиса, итд.), Као и појава лабораторијских метода за детекцију реактана.

Интензитет ЦП се процењује било плусовима (од 0 до 4 плуса) или са промјером папуле или упалним фокусом. С обзиром на могућност озбиљних компликација до анафилактички шок уметничке представе за непоштовање приручнику, као и сложеност тумачења резултата, држи приручник може бити само алергије канцеларије обучено особље под надзором алерголог.

ПРОВОЦАТОРНИ ТЕСТИ ЗА АЛЛЕРГИЈУ.


Провокативни тестови (ПТ) - метод етиолошке дијагнозе алергијских реакција, заснован на репродукцији ове реакције увођењем алергена у ударни орган. Према врсти шоковог органа (тј. Органу чија је лезија водећи на слици болести), разликују се следеће врсте ПТ.

Цоњунцтивал ПТ користе се за идентификацију алергена који узрокују развој алергијског коњунктивитиса или полиозе, која се јавља са феноменима коњунктивитиса. Обавља се опрезно због страха од изазивања оштре запаљенске реакције. Алерген се дигестира у нижим коњунктивалним врећицама у концентрацији која даје слабије позитиван ЦП. Уз позитивну реакцију, постоје лацримација, коњуктивна хиперемија, сврабови капци.

Насал ПТ примењују се за алергијски ринитис. Најсигурнији је. Алерген у истој дози као и код коњунктива ПТ сахрањен је у једној половини носа. Са позитивном реакцијом, кијање, србење у носу, ринореја, тешкоћа да се дише кроз ову половину носа. Откуцање слузнице шкољки, сужење носног пролаза одређено је риносцопицалли.

Удисање Фри обично се користи у бронхијалној астми. Студија се одвија у фази ремисије у болници. Ово је последица чињенице да је могуће одмах или касније (након 4-24 сата) развити тешки напад астме, тако да пацијенту треба посматрање. Пре подешавања, ПТ се снима на спирографу са природом кривине присилног ФЕЛ (ФВЦ) и његова вредност се израчунава у првој секунди - ФЗХЕЛ; такође израчунати Тиффно коефицијент, што је однос ФВЦ,; до процента у%. Код здравих људи, то је 70-80%. Онда пацијент прво удахне кроз инхалатор контролни раствор и, у одсуству реакције на њега, раствори алергена у низу, почев од минималних концентрација до оног који ће дати приметну реакцију. Сваки пут спирограми се снимају. Тест се сматра позитивним са смањењем ФВЦ-а! и коефицијент Тиффно за више од 20%. Развијени бронхоспазам заустављају бронходилатори. Са истовременим утврђивањем максималног волуметријског брзог протицања протока у различитим деловима криве издисавања може се закључити закључак о месту настале опструкције (мале или веће дисајне путеве). Поглавље 19 описује ПТ код егзогеног алергијског алвеолитиса.

Цолд Фри примјењују се на хладну уртикарију. На кожи подлактице ставите комад леда или жвакајте ледом 3 минута. Уз позитиван тест 5-6 мин након завршетка прехладе, развија се кожна реакција, обично одговара облику комада леда или конзерве.

Тхермал ПТ примењују се за термичку уртикарију. На кожи подлактице поставите пумпу топлом водом (40-42 ° Ц) 10 минута. Позитивну реакцију карактерише формирање блистера.

Леукоцитопениц ПТ примењују се за етиолошку дијагнозу хране и понекад алергије на лекове. У почетку, алергија хране пацијента на позадину исхране елиминације и током одмора два пута на сат одређује број леукоцита у периферној крви. Онда, ако разлика између две студије не прелази 0,3 • 10 г / л, дајте храну или лекове. Након 30, 60 и 90 минута број леукоцита је бројан. Тест се сматра позитивним са смањењем леукоцита за више од 1 • 10 У / Л. Са алергијом на лекове, требало би да будете пажљиви и не ставите тест у присуству анафилактичких реакција у анамнези. Негативни тест не искључује сензибилизацију тестираног алергена.

Тромбоцитопенијски ПТ такође се користи за етиолошку дијагнозу хране, а понекад и за алергије на лекове. Изводи се аналогно леукоцитопеној ПТ. Сматра се позитивним са смањењем броја тромбоцита за 25% или више.

Изложбени Фри користи као индикативне тестова. Истражује које се не јасни знаци болести су стављени у условима у којима могу да се наводним алергени, нпр апотека, у продавницу, шталу, до млина, уместо цветница, и др. У присуству релевантних алергена у окружењу развија погоршање болести.

Уз помоћ провокативних тестова, атопијски и имунокомплексни типови алергијских реакција су добро детектовани, теже је открити алергијску реакцију одложеног типа.


ЛАБОРАТОРИЈСКО ИСТРАЖИВАЊЕ У АЛЛЕРГИЈИ.


Велики значај за идентификацију постојеће сензибилизације је различит Имунолошке методе истраживање. Предност ових метода је њихова потпуна сигурност за пацијенте.
Све имунолошке методе откривања само стање сензибилизације т. Д. показује да је та особа већ изложен антигену (алергена). Они не могу послужити као индикација или доказ да је на антиген (алергена) развије алергијску реакцију, тако да примена алергијске реакције поред сензибилизацију потребан број додатних услова.

Да идентификује Реагин тип (И тип) сензибилизација, могу се користити следеће реакције:

  • радиоаллергосорбент тест (РАСТ), са којим ИгЕ антитела различитим врстама алергена;
  • радиоиммуносорбент тест (РИСТ), омогућавајући одређивање концентрације укупног ИгЕ. С обзиром да је тип реагиниц обољења праћен повећањем у укупном ИгЕ, повећана концентрација Иг је фактор, у дијелу потврђује део реагиниц механизма, а у одсуству болести-ће служити као фактор ризика за његов развој;
  • Сцхулз-Дале реакција - директно и пасивно. У експерименту се обично користи директна реакција. Да би се то урадило, сензибилисана животиња уклонила је орган глатких мишића, постављен у купку и поставио рекорд његових контракција. Затим се алерген додаје у купатило и процењује се интензитет спазма глатких мишића. Пасивна реакција се може користити за детекцију реактаната у серуму крви болесних особа. У ту сврху, комад јелеа мајмуна постављен је у каду, а затим се додаје серум пацијента.
    Антитела су фиксирана на цревима. Касније додавање алергена у присуству одговарајућег Ам изазива контракцију црева.
  • базофил тестови - директно и пасивно;
  • тест за специфично ослобађање хистамина;
  • дегранулациони тест маст ћелија.

Цитотоксични тип (тип ИИ) са сензибилизацијом може се открити помоћу:

  • различите варијанте методе имунофлуоресценција;
  • Цоомбс тест са аутоимунском хемолитичком анемијом;
  • радиоимунолошки метод истраживања;
  • Реакција Стеффена.
  • разни методе за одређивање циркулационих имуних комплекса у биопсијском материјалу депонованом у ткивима комплекса и анализи њиховог састава;
  • одређивање реуматоидни фактор;
  • различити начини одређивања преципитирајућа антитела.
  • Методе за одређивање лимфокина насталих након контакта са алергеном. Најчешће реакције ове врсте су инхибиција миграције макрофага и формирање лимфотоксина.


Имуноблот метода.

Тренутно се најчешће користи Имуноблот метода.
Имуноблоттинг (имуноблот) - високо специфичан и веома осетљива метода за детектовање референтно антитело на појединачне антигена (алергена) Иммуноблот и веома поуздана метода. Ова метода истраживања нема контраиндикација.


Аллергодиагностика Имуно ЦАП.

Последњих година уведене су нове технологије за прецизније тестирање дијагнозе алергије --- Аллергодиагностицс Иммуно ЦАП.
Зове се "Аллергоцхип Иммуно ЦАП".

За тестове ИммуноЦАП Користе се вештачки рекомбинантни алергени добијени молекуларним клонирањем. Уз помоћ, резултат је тачност која се не може постићи традиционалном методом - не само да се утврђују главне компоненте специфичне за одређени алерген, већ и мање. "Аллергоцхип" дозвољава не само да сазна тачно главни алерген, већ и супстанце које могу изазвати алергију на крв.

Овим методом се може утврдити и слаби облици алергијске реакције (дерматитис) и опаснијих (астма).
Одређивање концентрације ИгЕ омогућава не само дијагностицирање ове алергијске реакције, већ и предвидјање даљег развоја алергија.
Још једна важна предност ИммуноЦАР анализа је брзина извршења - четири дана. Али до сада је овај доступан. не за све лабораторије.

Испитивања коже

На основу алергијских реакција одложеног типа, - најједноставнији и приступачнији начин процене целуларног имунитета.

А. Антигени за испитивање коже. Тестови коже обично се обављају пречишћеним туберкулин, трицхопхитон, дерматофитин 0, тетанусни токсоид, антигени вируса заушака и Цоццидиоидес иммитис (прим. Цх. 18, тачка ИИИ.Ж и Табела. 22.2).

Б. Болести и услови, који су праћени инхибицијом ћелијског имунитета и, последично, алергијских реакција са закашњењем, наведени су у наставку.

1. Примарне и секундарне имунодефицијенције.

2. Акутне вирусне инфекције, укључујући и заушке, рубеле, ошопе, инфекцију узроковану вирусом варицелла-зостер, грипом, инфективном мононуклеозом.

3. Гљивичне инфекције, као што су кокцидиоидоза, криптококоза, аспергилоза.

4. Бактеријске инфекције, укључујући туберкулозу, бактеријски менингитис и пнеумонију.

5. Малигне неоплазме.

6. Имунизација са живим вирусним вакцинама.

7. Лечење са кортикостероидима и имуносупресивима.

8. Аутоимуне болести.

9. Велике операције.

Б. Техника извођења дермалних узорака

1. Површина коже за ињекцију се третира антисептиком.

2. Интрадермално убризгамо 0,1 мл раствора антигена. Да бисте то урадили, користите 1 мл туберкулински шприц и иглу 12 мм дужине 27 мм.

3. Поставите ињекцију у неизбрисиву оловку.

4. Након 24-72 часа (у зависности од коришћеног антигена) се мере две величине еритема и папула, израчунава се средња величина и приказује се тест коже у милиметрима.

Г. Реакција на интрадермално примање антигена и вријеме његовог развоја зависе од врсте антигена (види Сл. Табела. 22.2).

Испитивања коже

Примијенити кожне тестове за идентификацију алергијских болести посредованих реакцијама преосјетљивости типа И и ИВ. Техника извођења кожних тестова описана је у методичком писму АД Адо и сарадници. ("Коришћење алергена неинфицијског порекла за специфичну дијагнозу и десензибилизацију пацијената са алергијским обољењима", М., МЗ СССР, 1969). За кожне тестове се користе стандардни алергени, који садрже 10.000 јединица протеина азота (ПНУ) по мл. По правилу, кожна испитивања се постављају на унутрашњој површини подлактице. Истовремено, узорци се израђују са контролном течностом и хистамином. Код болести коже, тестови се врше на подручјима на која није оштећена. Тренутно се користе следећи тестови коже: капање, примена, прик тест, скарификација, интрадермална.

Испразните узорак

На кожи која је деградирана за 70% алкохола, капљице стандардног алергена примењују се на кожу. Реакција се процењује после 20 минута. Процена узорка дата је у Табели 15-1.

Евалуација узорка капи

Примјер примјене

На кожу претходно третираног са 70% алкохола наноси се комад газе (1 цм3), навлажен раствором алергена и фиксиран с лепком. Реакција се узима у обзир након 30, 60 минута, 6х, 12х, 24х, 48х, 72х. Процена примене узорка дата је у Табели 15-2.

Евалуација узорка апликације

Резултат реакције

Реакција коже

Прик тест

Прик-тест се изводи са посебним приц-ланцетом. Коришћен уређај нам омогућава да стандардизирамо дубину убризгавања (1,0-1,5 мм). Ињекција се врши путем капи алергена и контролне течности. Резултат прик теста узима се у обзир након 15-20 минута. Процена прик теста дата је у Табели 15-3.

Евалуација прик-тестова.

Резултат реакције

Реакција коже

Тест за скарификацију

На подлактици третира са 70% алкохола, примењује се у капима 0,01% контролног хистамин течности и алергени (алергена истовремено 6-10) на удаљености од 4-5 цм од другог. Култиватори сваке две капљице депоновани паралелна огреботине дуге 4-5 мм и растојање између 2 мм. Огреботине су површне, без оштећења посуда за кожу. 10 минута након што су кожа Сцарифицатион капи избрисани са вате. Узорци се узимају у обзир након 10-20 минута. Евалуација узорака узорка је дата у Табели 15-4.

Евалуација узорака за ожиљке.

Резултат реакције

Реакција коже

Треба запамтити да тестови скарификације често дају лажне позитивне реакције.

Интрадермални тестови

Изводите, по правилу, микробиолошке алергене. Са неинфективним алергенима се спроводе само у случајевима када тестови примене и скарификације дају негативан резултат, а анамнеза јасно указује на алергију.

Техника узорка је следећи: након третмана коже подлактице или уназад 70 степени алкохола инсулин сиринге интрадермално ординирати 0.02-0.1 мл алерген. Интрадермално примењени алерген треба да буде 10 пута мање концентриран него код скарификацијског тестирања. Као контролу интрадермално убризгана контролна течност и раствор сцарификације хистамина. узорци су прочитати на 20 минута, 6х, 12х, 24х, 48х према рејтинг скале, јер реакција на инфективним алергене може доћи и непосредну и одложеног типа.

Треба запамтити да су интрадермални тестови мање специфични од кожних тестова и врло често дају лажне позитивне и лажне негативне резултате. У интрадермалном тестирању, истовремена количина испитаних алергена не би требало да прелази 4-5.

Процена интрадермалних тестова

Популарно О Алергијама